瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA(瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗報告)

1. 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA

1. 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA

如果DNA出現(xiàn)降解或者是混有其他雜質(zhì),例如蛋白質(zhì)、RNA的話,那么瓊脂糖凝膠就能夠檢測得到DNA的質(zhì)量。 標(biāo)準(zhǔn)主要是通過觀察電泳條帶的亮度,通過亮度就可以粗略地計算出DNA條帶的含量。如果DNA出現(xiàn)損失,對應(yīng)的條帶就會變暗或者是消失。 線性的單一DNA樣品一般是單條帶,質(zhì)粒的話可能會有2-3條帶. 如果條帶變寬、變暗、或者變成彌散的DNA條帶,表示DNA非特異的降解. 如果條帶變成多條,表示可能被酶切.如果質(zhì)粒被單酶切,可能變成一條亮帶. 如果有蛋白質(zhì)污染,上樣孔可能發(fā)亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分會有彌散.

2. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗報告

2. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗報告

可以,瓊脂糖凝膠電泳可以通過限制性酶切多態(tài)性(RFLP)或者擴增片斷多態(tài)性(AFLP)來鑒定檢測的DNA。

就是不同DNA被特定的限制性內(nèi)切酶切出來的片斷大小是不一樣的,在瓊脂糖凝膠電泳跑出來的條帶也不一樣,如果是相同的DNA,結(jié)果就一樣。

3. 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA心得體會

1.凝膠濃度高了容易起泡,尤其是劣質(zhì)瓊脂糖(濃度1-2%就可以)

2.如果要用高濃度的話,可以試試趁膠還熱的時候,用小藥勺之類的東西把起泡趕到邊緣后挑起

3.剛加熱完是有小氣泡的,稍微靜置一下,等氣泡都消了,再倒進電泳槽

4.如果靜置到有點凝固了還是有氣泡的話,說明你加熱的時間不夠,沒有完全融化

4. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna注意事項

DNA如果降解或者混有其他雜質(zhì)比如蛋白質(zhì)、RNA的話,在電泳中可以檢測的到.線性的單一DNA樣品一般是單條帶,質(zhì)粒的話可能會有2-3條帶.如果條帶變寬、變暗、或者變成彌散的DNA條帶,表示DNA非特異的降解.‘如果條帶變成多條,表示可能被酶切.如果質(zhì)粒被單酶切,可能變成一條亮帶.如果有蛋白質(zhì)污染,上樣孔可能發(fā)亮.如果有RNA污染,可能小分子量部分會有彌散.等等.標(biāo)準(zhǔn)是電泳條帶亮度.通過亮度可以粗略計算DNA條帶的含量.如果DNA有損失,對應(yīng)的條帶會變暗或者消失

5. 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗報告注意事項

DNA分子在瓊脂糖凝膠中脈沖時有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)。DNA分子在高于等電點的ph溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。由于糖-磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上的重復(fù)性質(zhì),相同數(shù)量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。

6. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗結(jié)果圖

RNA分子有很多二級結(jié)構(gòu),需經(jīng)變性劑處理,而DNA一般不需要變性處理 RNA電泳的電泳槽及緩沖液均需要確保無RNAase,有RNAase抑制劑處理過;而DNA相應(yīng)的則需要DNAase抑制劑處理 所用的緩沖液不同 染色過程不同

7. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna實驗原理

二、實驗原理

瓊脂糖凝膠電泳是用于分離、鑒定和提純DNA片段的標(biāo)準(zhǔn)方法。瓊脂糖是從瓊脂中提取的一種多糖,具親水性,但不帶電荷,是一種很好的電泳支持物。DNA在堿性條件下(pH8.0的緩沖液)帶負電荷,在電場中通過凝膠介質(zhì)向正極移動,不同DNA分子片段由于分子和構(gòu)型不同,在電場中的泳動速率液不同。溴化乙錠(EB)可嵌入DNA分子堿基對間形成熒光絡(luò)合物,經(jīng)紫外線照射后,可分出不同的區(qū)帶,達到分離、鑒定分子量,篩選重組子的目的

8. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna失敗的原因

補充一點就是看看你的片段是否有這個酶的酶切位點。

盡管有些好笑,但是有人確實犯過這樣的錯誤。

你提取的質(zhì)粒濃度很低的話,在酶切的時候就少加點水多加點質(zhì)粒。

不然濃度低當(dāng)然看不見。

9. 瓊脂糖凝膠電泳檢測dna時點樣孔放哪

DNA分子在高于其等電點的pH溶液中中帶負電,因為所說的等電點是指蛋白質(zhì)或兩性電解質(zhì)所帶凈電荷為零時溶液的pH,此時蛋白質(zhì)或兩性電解質(zhì)在電場中的遷移率為零.當(dāng)外界溶液的pH大于兩性離子的等電點值,兩性離子釋放質(zhì)子帶負電;當(dāng)外界溶液的pH小于兩性離子的等電點值,兩性離子質(zhì)子化帶正電.

推薦閱讀

熱文